巴戟天多糖和淫羊藿苷促进视磺酸诱导的P19细胞增殖和分化

目的 探讨巴戟天多糖和淫羊藿苷(ICA)对视磺酸(RA)诱导P19细胞向生精细胞方向分化的影响.方法 MTT法分析巴戟天多糖和ICA对RA诱导的P19细胞增殖的影响,明确两者的最佳作用浓度及作用时间;流式细胞术检测巴戟天多糖和ICA对RA诱导的P19细胞凋亡的影响;实时定量PCR分析两者对RA诱导P19细胞向生精细胞方向分化进程的影响;Western Blot从蛋白水平进一步进行验证.结果 终浓度4μmol/L的RA可诱导P19向生精细胞方向分化,表达生精细胞特异性未分化精原细胞标志物Plzf和精原细胞分化减数分裂启动标志物Stra8;MTT检测显示巴戟天多糖和ICA可以促进RA诱导的P19细胞增殖,最佳作用浓度分别为0.5 mg· L-1和7.5 μmol/L;Annexin V-FITC/PI标记后流式细胞仪检测细胞凋亡水平,未见巴戟天多糖和ICA对RA诱导的P19细胞凋亡有显著影响;转录和蛋白水平分析显示巴戟天多糖和ICA可以促进RA诱导P19细胞向生精细胞分化进程,胚胎干细胞(ES)标志物Oct4表达显著降低,Plzf和Stra8表达显著增高后下降;但是不添加RA时,巴戟天多糖和ICA不能直接诱导P19细胞向生精细胞方向分化.结论 巴戟天多糖和ICA可以促进RA诱导的P19细胞增殖和向生精细胞方向分化的进程.