APOE-TREM2介导的蛇床子素对阿尔兹海默病体外细胞模型的抗炎机制研究

目的 探究载脂蛋白E(APOE)-髓细胞触发受体2(TREM2)信号通路介导的蛇床子素(Osthole)对阿尔兹海默病体外细胞模型的抗炎作用机制.方法 将小鼠小胶质细胞(BV2细胞)分为:空白组、溶剂组(0.1％DMSO)、模型组(Aβ1-42,10 μmol·L-1)、阳性药组(地塞米松,2.5 μmol·L-1)及蛇床子素高、中、低剂量组(25、5、1μmol·L-1).给药组分别给予药物预保护4h后,再给予Aβ1-42诱导损伤24 h,建立阿尔茨海默病BV2细胞模型.采用CCK-8法检测细胞存活率;ELISA法检测细胞炎性因子白细胞介素(IL)1β、肿瘤坏死因子(TNF)α的表达;免疫荧光法检测细胞促炎表型M1型标志物CD16/32的表达;倒置显微镜观察BV2细胞培养上清对SH-SY5Y细胞形态的影响;流式细胞术检测BV2细胞培养上清对SH-SY5Y细胞凋亡的影响;采用Western Blot、qPCR法检测细胞中APOE、TREM2蛋白及基因的表达情况.结果 与空白组比较,模型组BV2细胞存活率明显降低(P＜ 0.001),TNF-α、IL-1β分泌量明显增加(P＜ 0.001),CD16/32荧光明显增强,SH-SY5Y细胞损伤明显,SH-SY5Y细胞凋亡率明显升高(P＜ 0.001),APOE、TREM2蛋白及mRNA表达显著上调(P＜ 0.01,P＜0.001).与模型组相比,蛇床子素组的BV2细胞存活率明显升高(P＜ 0.01,P＜0.001),TNF-α、IL-1β分泌量明显减少(P＜0.01,P＜0.001),CD16/32荧光明显减弱,SH-SY5Y细胞形态有所改善且凋亡率明显降低(P＜ 0.05,P＜0.01,P＜0.001),APOE、TREM2蛋白及基因表达明显下调(P＜ 0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 蛇床子素对Aβ1-42诱导的BV2细胞的炎性反应有较好的治疗作用,其机制可能与下调APOE、TREM2蛋白及基因表达有关.