玻璃化冷冻和程序化冷冻人卵巢组织的效果

目的 探讨玻璃化冷冻和程序化冷冻两种方法冻存人卵巢皮质的效果.方法 收集因卵巢疾病患者需手术切除的卵巢组织标本,并随机分成玻璃化冷冻组、程序化冷冻组和新鲜对照组,分别进行组织学分析、窦前卵泡的分类计数和卵巢皮质的培养,比较3组卵巢组织内卵泡形态学、卵巢组织混悬液中卵泡计数和卵巢皮质培养上清液的雌二醇(E2)水平.结果(1)组织学分析:两冷冻组卵巢皮质中始基卵泡完整率明显低于新鲜对照组(84.62％、80.21％vs.97.93％,P<0.001),但两冷冻组之间差异均无统计学意义(P>0.05);程序化冷冻组次级卵泡完整率明显低于新鲜对照组(37.5％vs.88.24％,P<0.05);(2)窦前卵泡的计数:玻璃化冷冻组和程序化冷冻组单位体积卵巢组织混悬液中始基卵泡计数均明显低于新鲜对照组[(76.50±8.91)&(79.67±10.40)vs.(91.50±8.70),P=0.001];程序化冷冻组每100μL卵巢组织混悬液中初级卵泡和次级卵泡计数均明显低于新鲜对照组[(22.83±3.74)vs.(27.33±3.02),(9.50±3.46)vs.(12.55±3.25),P<0.05];(3)卵巢组织培养液中的E2水平:体外培养的初期阶段(D2?D6),冻融卵巢组织分泌的E2水平低于新鲜组织(P<0.05),之后阶段各组间上清液E2水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 玻璃化冷冻和程序化冷冻均能有效地保存人卵巢组织的活性;玻璃化冷冻方法简单易行,对于次级卵泡的保存效果优于程序化冷冻组,更适合人卵巢组织的冷冻保存.