溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒诱导结肠癌肝转移小鼠产生的脾淋巴细胞对结肠癌小鼠肺转移瘤的影响

目的:探讨溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒（oHSV2）诱导结肠癌肝转移小鼠模型产生的脾淋巴细胞对结肠癌肺转移瘤生长的影响。方法:选择18只6周龄BALB/c雌性小鼠，取对数生长期小鼠结肠癌细胞株CT26细胞，分别接种于小鼠右侧背部（2×10 5/只）和脾（1×10 5/只），肿瘤细胞通过脾静脉血行转移至肝，构建CT26结肠癌肝转移瘤模型；采用随机数字表法分为oHSV2组和磷酸盐缓冲液（PBS）组，每组9只；oHSV2组采用100 μl oHSV2（感染复数为1）进行皮下瘤内多点注射，PBS组采用100 μl PBS进行皮下瘤内多点注射；隔1 d注射1次，共6次；采用Kaplan-Meier法分析小鼠存活情况，观察肿瘤生长情况；荷瘤后第20天处死两组结肠癌肝转移模型小鼠，分离其脾淋巴细胞。摸索结肠癌肺转移瘤CT26细胞株最佳接种数量和最适观察时间点；选择9只正常的6周龄BALB/c雌性小鼠，采用随机数字表法分为实验组、阴性对照组和空白对照组，每组3只。实验组小鼠尾静脉同时接种oHSV2诱导结肠癌肝转移小鼠模型产生的脾淋巴细胞（4×10 7/只）和CT26细胞（2×10 5/只），阴性对照组小鼠尾静脉同时接种相同周龄正常小鼠的脾淋巴细胞（4×10 7/只）和CT26细胞（2×10 5/只），空白对照组小鼠尾静脉只注射CT26细胞（2×10 5/只）；荷瘤后第10天全部处死3组小鼠，观察肺转移瘤的生长，小鼠存活情况，观察小鼠各组织病理形态改变。 结果:结肠癌肝转移小鼠模型中，oHSV2组9只小鼠中7只未发现肝转移灶，2只出现1~2个长径<2 mm肝转移灶；PBS组9只小鼠均出现多发性肝转移灶，肿瘤长径1~10 mm。oHSV2组小鼠总生存优于PBS组小鼠（ P<0.001）。结肠癌肺转移瘤小鼠模型中，小鼠尾静脉接种肿瘤细胞的最佳细胞数量为2×10 5/只，最佳观察时间点为尾静脉注射后第10天；荷瘤24 d后阴性对照组和空白对照组小鼠均全部死亡，实验组小鼠在第60天仍全部存活，3组间总生存差异有统计学意义（ P=0.007）；HE染色结果显示，实验组小鼠肺脏组织未见明确肿瘤细胞，阴性对照组和空白对照组的肺脏组织有广泛弥漫的肿瘤细胞。 结论:oHSV2诱导结肠癌肝转移小鼠模型产生的脾淋巴细胞能够有效抑制CT26小鼠结肠癌肺转移瘤的生长。