虎杖苷对小鼠芥子气肺损伤的保护作用

目的 明确虎杖苷对芥子气所致肺损伤的改善作用,并初步探索其作用机制.方法 在存活率实验中,将雄性ICR小鼠随机分为6组(n=15):对照组,芥子气(40 mg/kg)组,虎杖苷低、中、高剂量(100、200、400 mg/kg,每天1次,持续7 d)组,以及阳性对照药(N-乙酰半胱氨酸200 mg/kg,每天1次,持续7 d)组;在存活率以外的实验中,将雄性ICR小鼠随机分为4组(n=15):对照组、芥子气(30 mg/kg)组、虎杖苷中剂量(200 mg/kg,每天1次,持续5 d)组、阳性对照药(N-乙酰半胱氨酸200 mg/kg,每天1次,持续5 d)组.皮下注射芥子气溶液建立小鼠芥子气肺损伤模型,虎杖苷处理组与阳性对照药组灌胃给药.通过存活率实验初步评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的作用效果,确定虎杖苷最佳给药剂量;通过肺组织切片评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的改善作用;通过ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和过氧化氢等氧化应激指标及IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症反应指标的变化;通过蛋白质印迹法考察沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)等氧化应激关键蛋白及Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65等炎症关键蛋白的表达水平.结果 与芥子气组相比,虎杖苷中、高剂量组小鼠的存活率升高,其中虎杖苷中剂量组效果更显著(P<0.01).虎杖苷中剂量干预可以升高染毒小鼠肺组织中SOD活性、GSH含量,降低染毒小鼠肺组织中MPO活性、MDA含量、过氧化氢含量及IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子的水平(P<0.05或P<0.01);提升染毒小鼠肺组织中SIRT1蛋白的表达,促进Nrf2的核转移,提升HO-1、NQO1蛋白的表达(P<0.05或P<0.01);降低染毒小鼠肺组织中TLR4、NF-κB p65总蛋白及磷酸化NF-κB p65蛋白的表达(P<0.01).结论 虎杖苷可能通过调控SIRT1/Nrf2和TLR4/NF-κB通路抑制芥子气诱导的氧化应激和炎症反应,从而改善芥子气导致的小鼠肺损伤.