绵羊TNF-α基因启动子克隆、活性分析及转录因子预测

绵羊肺炎支原体感染诱导绵羊TNF-α上调表达的机制不明;据报道,TNF-α上调表达与其启动子激活密切相关.然而,绵羊TNF-α启动子尚未克隆,以及其启动子活性水平也不清楚.因此,通过对绵羊TNF-α 启动子预测分析,以绵羊肺组织DNA为模板克隆TNF-α启动子,构建荧光素酶报告载体;进一步,利用双荧光素酶报告系统检测TNF-α启动子活性;最后,利用AliBaba 2.1软件预测TNF-α启动子上潜在的转录因子结合区域.结果显示,克隆的绵羊TNF-α启动子区域含有TATA-box元件,启动子具有很强的活性;绵羊TNF-α启动子中预测到9个潜在的转录因子结合区域,分别是6个Sp1、2个C/EBPalp和1个c-Jun.通过克隆绵羊TNF-α启动子、预测潜在的转录因子结合区域等,为进一步研究病原菌诱导绵羊TNF-α高水平表达的机理奠定了基础.