条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究
Journal of Zhejiang Institute of Science and Technology（2022）
摘要
对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒 pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达以及纯化重组单域抗体,通过ELISA和细胞水平检测重组单域抗体的活性.结果表明:通过生物信息学分析筛选出2条特异性序列,在16℃、0.5 mmol/L诱导剂条件下可获得2 mg/mL以上的重组蛋白;ELISA检测显示均与HBsAg具有较好的结合力,细胞水平活性分析得到Anti-HBsAg-S1具有较好的病毒抑制效果和生物学活性.该研究结果为其他抗原的特异性抗体筛选提供理论参考.
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