保存液类型及56℃灭活前处理对呼吸道病毒荧光PCR检测结果的影响

目的:探讨保存液类型及56℃灭活前处理30～60 min对经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果的影响.方法:将灭活的呼吸道病毒作为质控品,分别以非灭活型病毒保存液和含胍盐的灭活型病毒保存液为基质,制备成两种不同保存液类型的中、低、较低浓度的临床模拟样本.分别在常温与56℃下对样本进行30～60 min的灭活前处理,然后统一采用核酸提取试剂盒(磁珠法)和呼吸道病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)对样本进行检测,并采用SPSS18.0软件分别对三个稀释梯度样本的ORF1ab、N基因Ct值进行统计学分析.结果:两种病毒保存液经磁珠法提取核酸,呼吸道病毒核酸检测的Ct值相比有统计学差异(ORF1ab基因:P<0.05,t=12.085;N基因:P<0.05,t=4.255),含胍盐的灭活型病毒保存液的Ct值比非灭活型病毒保存液靠前0.5～1.5 Ct.两种类型的病毒保存液在常温、56℃下进行30～60 min的灭活前处理后,呼吸道病毒核酸检测组内Ct值的随机区组方差分析无统计学意义(P>0.05).结论:含胍盐的灭活型病毒保存液可提高经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果的灵敏度,56℃灭活前处理30～60 min未对经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果产生影响.