丹酚酸B通过AKT/Bim/Bcl-2通路抑制肾细胞癌生长的机制研究

目的:研究丹酚酸B(SalB)对人肾透明细胞腺癌(ccRCC)细胞786-O生长、凋亡和蛋白激酶B(AKT)/细胞死亡调解子(Bim)/B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)通路表达的影响.方法:采用不同浓度SalB(40、80、120μmol/L)处理ccRCC细胞786-O 96h后,MTT比色法检测细胞生长活力;单克隆形成实验测定细胞增殖能力;膜联蛋白V(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)凋亡双染试剂盒测定细胞凋亡情况;活性氧检测试剂盒测定细胞内活性氧累计水平;荧光定量PCR检测细胞内AKT、Bim、Bcl-2、Bcl-2相关性X蛋白(Bax)及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的表达水平;Western blot检测细胞内AKT、磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、Bim、Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达水平.结果:SalB处理组和对照组相比,786-O细胞生长明显受到抑制(P<0.05).SalB可引起细胞内活性氧物种(ROS)的累计并促进细胞凋亡(P<0.05),可抑制pAKT、Bcl-2及Caspase 3蛋白的表达(P<0.05),并促进Bim和Bax蛋白的表达(P<0.05).结论:SalB能够在体外抑制ccRCC细胞生长并促进细胞凋亡,可能与SalB增加肿瘤细胞内ROS含量、调节AKT/Bim/Bcl-2信号通路相关蛋白的表达和活性有关.