灰树花子实体多糖硫酸酯化及抗凝血活性研究

目的:优化灰树花子实体多糖硫酸酯化的工艺条件,探讨其硫酸酯化多糖的抗凝血活性.方法:灰树花子实体经过醇沉、碱提得到水不溶性多糖组分(Polysaccharide of Grifola frondosa,GF).对硫酸酯化工艺中的反应温度、时间、原料比例条件进行优化.通过活性部分的凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT)测定硫酸酯化多糖(Sulfated polysaccharide of Grifola frondosa,S-GF)的抗凝血活性.溶栓活性采用纤维蛋白板法测定.结果:最终确定硫酸酯化温度为60℃,时间3 h,GF:氯磺酸=200 mg:20 mL为最佳工艺条件.硫酸酯化多糖S-GF的取代度为2.01.经过Sephadex G50柱层析证明S-GF为均一组分.不同浓度的S-GF均能有效延长APTT和TT,并且随着浓度的增大,APTT和TT延长的时间越长,而对PT未见明显延长.结论:S-GF具有一定的抗凝血特性,并且是通过内源性凝血途径来实现抗凝血的,但是比肝素钠的抗凝血能力低.