SHP2抑制剂PHPS1通过调节MAPK通路对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的 探讨SHP2抑制剂PHPS1通过调节MAPK通路对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响.方法 体内实验:将8周龄雄性C57BL/6J-ApoE-/-小鼠随机选取10只作为对照组,不做其他特殊处理,其余小鼠进行6周的高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型,建模成功后将其随机分为模型组[腹腔注射0.9％氯化钠溶液3 mg·kg-1·d-1,n=10]和PHPS1组[腹腔注射PHPS1剂量3 mg·kg-1·d-1,n=10],同时对照组也给予腹腔注射0.9％氯化钠溶液3 mg·kg-1·d-1,1次/d,持续20 d.体内实验:通过全自动生化仪检测小鼠体内TG、TC、HDL-C及LDL-C的表达水平;通过Movat染色评估主动脉根部斑块面积并观察3组小鼠动脉粥样硬化斑块的病理变化;通过Western blot检测3组p-SHP2、p-JNK、p-p38 MAPK及p-ERK蛋白的表达水平.体外实验:将小鼠来源的巨噬细胞RAW246.7培养于DEME培养基中,将其分为3组:对照组(未予特殊处理的DEME培养基)、模型组(给予ol-LDL处理的DEME培养基)及PHPS1组(同时给予ol-LDL和PHPS1处理的DEME培养基),通过Western blot检测各组细胞p-SHP2、p-JNK、p-p38 MAPK及p-ERK蛋白水平.结果 体内实验:全自动生化仪结果显示,模型组小鼠中TG、TC及LDL-C表达最高,HDL-C表达最低,其次依次为PHPS1组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Movat染色结果显示,PHPS1组主动脉根部显示斑块面积较模型组明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05),而对照组无动脉粥样硬化斑块;对照组内膜无增厚,基本无泡沫细胞及斑块,模型组内膜明显增厚且伴有大量的泡沫细胞聚集及炎性细胞浸润,中膜细胞排列紊乱,PHPS1组内膜增厚程度较模型组明显减轻且泡沫细胞聚集及炎性细胞浸润明显;Western blot检测结果显示,模型组p-SHP2、p-JNK、p-p38 MAPK及p-ERK的蛋白表达水平最高,其次依次为PHPS1组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).体外实验:Western blot检测结果显示,模型组p-SHP2、p-JNK、p-p38 MAPK及p-ERK蛋白的表达化水最高,其次依次为PHPS1组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SHP2抑制剂PHPS1通过下调MAPK信号通路从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成.