过氧化物还原酶4蛋白对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制

目的:探讨过氧化物还原酶4(Prdx4)蛋白对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及相关机制.方法:免疫荧光明确Prdx4在人卵巢颗粒细胞(KGN)中的定位;利用Prdx4小干扰RNA(siRNA)转染小鼠卵巢颗粒细胞,以空白组作为对照,蛋白质印迹法检测Prdx4表达水平以验证干扰效果,并检测2组颗粒细胞凋亡相关因子[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)]及内质网应激相关因子[免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)]的表达.利用流式细胞仪检测2组颗粒细胞凋亡率,电镜下观察2组颗粒细胞的内质网形态.结果:利用免疫荧光共定位明确Prdx4主要定位于颗粒细胞的内质网中.转染Prdx4-siRNA的小鼠颗粒细胞Prdx4表达水平低于空白对照组(P<0.01);下调Prdx4蛋白表达导致小鼠颗粒细胞凋亡率增加(P<0.05),促凋亡蛋白Bax及cleaved caspase 3蛋白表达水平增加(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05).电镜下观察Prdx4-siRNA处理组内质网显著扩张,蛋白质印迹法显示Prdx4-siRNA处理组内质网应激相关蛋白BIP、ATF4及CHOP表达水平均高于空白对照组(均P<0.05).结论:Prdx4蛋白表达水平下调可通过促进小鼠颗粒细胞内质网应激进而导致颗粒细胞凋亡.