NOX2、NLRP3在肝纤维化患者血清中的表达及其生物学意义

目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)在肝纤维化患者血清中的表达及生物学意义.方法:选取2017年9月至2020年9月我院收治的80例肝纤维化患者为研究对象,同期选取80例我院收治的酒精性肝炎患者为对照组.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测受试者血清中NOX2、NLRP3的表达,并比较肝纤维化患者与对照组患者血清中NOX2、NLRP3的表达差异.体外培养肝星状细胞(HSC)系LX-2,用6 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激24 h,活化并分为Control组、NC组、NOX2 siRNA组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中NOX2、NLRP3的mRNA表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞ROS水平;蛋白免疫印迹(WB)检测增殖蛋白CyclinD1、CDK4,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9及NOX2、NLRP3、IL-18、IL-1β的表达.结果:与对照组患者比较,肝纤维化组患者血清NOX2、NLRP3的表达显著升高(P<0.05);与Control组比较,NOX2 siRNA组细胞NOX2、NLRP3的mRNA表达、细胞内ROS含量,增殖蛋白CyclinD1、CDK4及蛋白NOX2、NLRP3、IL-18、IL-1β的表达均显著降低,细胞增殖抑制率、凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达显著升高(P<0.05).结论:NOX2、NLRP3可能参与肝纤维化的发生,其可能是治疗肝纤维化的靶点.