瑶药苦赖咪总醌提取物的制备及其抗肝癌活性研究

目的 研究瑶药苦赖咪总醌提取物的制备方法,并分析该提取物对人肝癌细胞的抑制作用.方法 采用醇提再酸碱处理及有机溶剂萃取的方法获得瑶药苦赖咪的醌类提取物,采用分光光度法对提取物中总醌的含量进行测定.使用不同浓度苦赖咪总醌提取物干预人肝癌HepG2细胞后,采用细胞计数检测法检测细胞增殖抑制率,通过细胞克隆形成实验、划痕实验分别检测HepG2细胞克隆、迁移能力,并采用PCR法检测HepG2细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)mRNA的表达水平.结果 (1)提取物的总醌含量为52.31％.(2)随着干预浓度的增加,苦赖咪总醌提取物对HepG2细胞的抑制作用总体呈增强趋势,且在25～200μg/mL的浓度范围内其抑制作用呈浓度依赖性.(3)经50μg/mL、100μg/mL苦赖咪总醌提取物干预24 h后,HepG2细胞的克隆形成数减少,细胞迁移率降低,且药物浓度越高,细胞克隆形成数越少,细胞迁移率越低(均P<0.05).(4)经100μg/mL苦赖咪总醌提取物干预后HepG2细胞中的TNF-αmRNA表达水平升高,而IL-8 mRNA表达水平下降(均P<0.05).结论 瑶药苦赖咪的总醌提取物能够抑制人肝癌细胞增殖、克隆和迁移能力,其可能通过上调TNF-α表达、下调IL-8表达而发挥抗肿瘤作用.