过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型的影响及其机制

目的:探讨过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型的影响及其机制.方法:制备TCR-β-'小鼠分别经生理盐水和母牛分枝杆菌雾化后γδT细胞悬浮液;将32只无特定病原体(SPF)级雄性Balb/c小鼠随机均分为A组、B组、C组、D组,A组为阴性对照组,B组为哮喘模型对照组,C组为过继经生理盐水雾化后的γδT细胞对照组,D组为过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞预防组;B组、C组、D组均用鸡卵清蛋白(OVA)常规制备哮喘模型,C组、D组都在第1次腹腔注射OVA前10 min及第1次雾化OVA激发前10 min经鼠尾静脉分别注射1×106个γδT细胞;A组腹腔注射及雾化均用PBS代替;末次雾化后24h内检测气道反应性,处死小鼠,行支气管肺泡灌洗收集肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附测定实验(ELISA)检测BALF的IL-13和IL-5的水平,取肺组织做苏木精—伊红(HE)和过碘酸—雪夫(PAS)染色,免疫组织化学实验检测肺组织中T-bet/GATA3蛋白的表达.结果:B组小鼠气道反应性高于A组、D组(P＜0.05),D组小鼠气道反应性低于B组(P＜0.05),C组小鼠气道反应性相比B组变化不明显;相对比于B组、C组,D组支气管周围炎症细胞浸润减少,D组管腔中杯状细胞较B组、C组减少;B、C组中肺组织的IL-13、IL-5表达高于A、D组(P＜0.05);B组、C组肺组织的GATA3表达明显高于A组、D组(P＜0.05),T-bet表达低于A、D组(P＜0.05).结论:过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型具有预防作用,可能与分别上调或下调T-bet、GATA-3水平,以及调节IL-13、IL-5分泌有关.