13个快速突变Y-STR复合扩增体系的建立

目的 建立一套包含迄今所知全部13个快速突变Y-STR基因座的复合扩增检测体系,并对其进行性能验证及法医学应用价值评估.方法 采用五色荧光标记技术,通过引物设计、体系调配,构建出包含13个快速突变Y-STR基因座(DYF387S1、DYF399S1、DYF403S1、DYF404S1、DYS526、DYS449、DYS518、DYS547、DYS570、DYS576、DYS612、DYS626、DYS627)的一套复合扩增体系.根据文献和Sanger法测序,总结了一套快速突变Y-STR基因座的推荐命名方式.对该体系的灵敏度、种属特异性、抗抑制能力等性能及对DNA混合样本的扩增效果进行测试.结果 成功构建了一套快速突变Y-STR检测体系,归纳整理了一套推荐命名方式.经优化,该体系在退火温度为59℃、扩增循环数为28次时扩增效果最佳.体系灵敏度达0.125ng,有良好的种属特异性,对EDTA、血红素、腐殖酸及靛蓝等有较强的抗抑制能力.在高浓度的女性背景下(男女成分比为1∶4000),体系仍能扩增出完整的男性DNA分型.同时,对不同比例的男性DNA混合样本也表现出较好的扩增效果.结论 本文构建的复合扩增检测体系性能良好,可用于男性家系的精细化排查,可作为常见Y-STR检测试剂盒的重要补充.