贝那鲁肽对高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡的影响及机制研究

目的 探讨贝那鲁肽对高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡的影响以及相关机制.方法 将INS-1胰岛β细胞随机分为对照组、高糖组、贝那鲁肽处理组、MG-132预处理组和ISO-1预处理组,对照组给予5.5mmol/L葡萄糖处理,高糖组给予30 mmol/L葡萄糖处理,贝那鲁肽处理组在高糖组的基础上给予1 nmol/L贝那鲁肽处理,MG-132预处理组和ISO-1预处理组分别在高糖的基础上给予20μmol/L MG-132和50μmol/L ISO-1预处理.培养24h后噻唑蓝(MTT)比色法评估细胞的活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测INS-1胰岛β细胞胰岛素和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的分泌,Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax和cleaved caspase 3)和NF-κB通路相关蛋白(p-IκB,IκB和NF-κBp65)的表达.结果 与对照组相比,高糖组胰岛β细胞的存活率(t=4.949,P<0.01)、胰岛素的分泌(t=3.168,4.273,均P<0.05)和IκB的表达(t=3.062,P<0.05)明显降低,凋亡相关蛋白(Bax和cleaved caspase 3)的表达(t=2.923,3.141,均P<0.05)、p-IκB和NF-κB p65表达(t=3.544,4.658,均P<0.01)以及MIF分泌(t=3.024,P<0.05)明显增加.与高糖组相比,贝那鲁肽处理组可逆转高糖组上述指标的变化(t=2.415～4.290,均P<0.05),差异均有统计学意义.进一步给予NF-κB抑制剂MG-132和MIF抑制剂ISO-1预处理后,与高糖组相比,MG-132预处理组和ISO-1预处理组均可改善高糖诱导的INS-1胰岛β细胞胰岛素分泌功能(t=2.515～6.867,均P<0.05),还可降低凋亡相关蛋白Bax(t=4.022,2.554,均P<0.05)和cleaved caspase 3(t=4.022,2.760,均P<0.05)的表达,差异均有统计学意义.结论 贝那鲁肽可通过抑制NF-κB/MIF依赖的炎症途径减轻高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡.