磷酸肌酸钠联合果糖二磷酸钠通过miR-133b/ELAVL1分子轴缓解小儿病毒性心肌炎的机制研究

目的:探讨磷酸肌酸钠联合果糖二磷酸钠缓解小儿病毒性心肌炎的作用机制.方法:以2018年1月至2020年1月就诊于该院的2～6周岁病毒性心肌炎患儿120例为研究对象,根据给药情况,分为磷酸肌酸钠组、果糖二磷酸钠组和磷酸肌酸钠+果糖二磷酸钠组,每组40例.检测治疗前后三组患儿的心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白T(cTnT)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)]及miRNA表达水平.使用柯萨奇病毒B组3型Nancy株(CVB3)病毒处理人心肌细胞(HCM)构建模型细胞(CVB3-HCM),采用CCK-8检测细胞活性,以实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测基因表达,以酶联免疫吸附试验检测细胞因子,以免疫荧光染色确定蛋白表达水平和细胞定位,以双荧光素酶报告基因实验验证基因靶向关系.结果:与治疗前相比,磷酸肌酸钠+果糖二磷酸钠组患儿体内cTnT、CK-MB、TNF-α及IL-6水平在治疗后均显著降低,miR-133b表达水平在治疗后显著上调.细胞水平实验发现,将miR-133b mimics转染至CVB3-HCM,ELAVL1蛋白水平明显降低.在心肌损伤标志物、炎症因子水平及细胞焦亡水平方面,经磷酸肌酸钠+果糖二磷酸钠处理的CVB3-HCM细胞上述指标水平明显降低;而经磷酸肌酸钠+果糖二磷酸钠处理的转染miR-133b inhibitor的CVB3-HCM细胞和转染pcDNA-ELAVL1的CVB3-HCM细胞中上述指标水平更低,低于仅经磷酸肌酸钠+果糖二磷酸钠处理的CVB3-HCM细胞.结论:磷酸肌酸钠联合果糖二磷酸钠可有效缓解小儿病毒性心肌炎,其作用机制可能是通过调控miR-133b/ELAVL1分子轴,抑制病毒导致的心肌细胞损伤、炎症反应及细胞焦亡.