番茄青枯病拮抗菌株的筛选、鉴定及发酵条件的优化

目前,对于番茄青枯病害的发生缺乏有效的预防措施,筛选和利用有益微生物是重要途径之一.试验以番茄青枯病病原菌为靶标菌,采用稀释涂布分离法、平板对峙法从健康番茄植株根际土壤中分离筛选对青枯病菌有较好拮抗作用的菌株,结合形态学特征、生理生化特征、分子生物学方法等对其进行菌种鉴定,且采用单因素试验及正交试验方法,对拮抗菌株B-6的发酵培养液配方及发酵条件进行优化.结果表明,从番茄青枯病重病田块的健康植株根际土壤中分离筛选到1株抑菌效果较好的细菌菌株B-6,抑菌圈直径为13.8 mm;对拮抗菌株B-6进行鉴定,经16S rDNA测序并进行同源性比较得出,拮抗菌株B-6与铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugi?nosa strain Pa84)的16S rDNA序列相似性达到100％;优化后的最佳培养基组合为麦芽糖3％(30 g)、蛋白胨1.0％(10 g)、氯化钠1.0％(10 g)、蒸馏水1000 mL,最佳发酵条件为摇床转速180 r/min、发酵时间24 h、装液量100 mL(规格为250 mL锥形瓶)、接种量1.0％(1 mL),pH值8,经发酵优化后的抑菌圈直径为16.5 mm,比原抑菌圈直径增大19.6％.研究分离筛选到的拮抗菌株B-6为1株具有开发潜力的生防菌株.