uc.339经miR-95/K-RAS通路促进肾癌的生长

目的 探讨uc.339经miR-95/K-RAS促进肾癌细胞增殖、凋亡和迁移的机制.方法 收集76例肾透明细胞癌组织及癌旁正常组织,应用RNA原位杂交技术检测uc.339表达情况,并分析其与肾透明细胞癌患者病理参数的相关性.CCK-8法检测肾癌细胞增殖活性;Annexin V/PI法检测细胞凋亡;Transwell小室检测肾癌细胞的迁移能力;双荧光素酶报告实验验证miR-95对靶基因K-RAS的调控;Western blot方法分析uc.339下游基因蛋白的表达.结果 uc.339在肾透明细胞癌组织中呈阳性表达,占77.63％(59/76),其阳性表达与肿瘤大小、肿瘤TNM分期均密切相关(P＜0.05).uc.339对肾癌细胞迁移能力无影响.过表达uc.339促进肾癌增殖活性、抑制细胞凋亡,而降低uc.339表达则抑制肾癌增殖活性、促进细胞凋亡(P＜0.05).实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证uc.339下游靶基因是微小RNA-95(miR-95);双荧光素酶报告基因实验表明miR-95与K-RAS的结合具有特异性,K-RAS是miR-95的直接靶基因.Western blot和Rescue实验表明无论uc.339和miR-95如何变化,K-RAS都能受到uc.339的调控.结论 在肾癌中,uc.339抑制了 miR-95的表达,进而升高K-RAS蛋白水平,促进肾癌生长.本研究为今后诊断和治疗肾癌提供有力的理论依据.