融合IL2的慢病毒实现对T细胞的高效基因转导

目的 制备融合IL2的慢病毒以提高对人原代T淋巴细胞的转导效率.方法 将白细胞介素-2(IL2)基因定向克隆至水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)编码基因5′端,构建新型慢病毒包装辅助质粒pMD2.IL2-G.使用不同剂量pMD2.IL2-G进行慢病毒包装,应用免疫印迹和ELISA比较病毒滴度,流式细胞术检测病毒对T细胞的转导效率.结果 单独使用pMD2.IL2-G显著降低病毒得率.与传统慢病毒相比,pMD2.IL2-G与原始辅助质粒pMD2.G以1:4混合制备的慢病毒,能够显著提高EGFP基因导入T细胞的效率(89.2％vs.40.2％),且病毒得率相当.结论 融合IL2的慢病毒能够对T细胞进行高效的基因转导,为基因修饰T细胞的临床应用提供有力支持.