沉默EMI2基因抑制肝内胆管癌HuCCT1细胞的增殖和上皮间质转化

目的:探索早期有丝分裂抑制子2(early mitotic inhibitor 2,EMI2)在肝内胆管癌(intrahepatic cholan-giocarcinoma,iCCA)中的表达及生物学功能,并探讨EMI2对iCCA细胞HuCCT1增殖、侵袭及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响.方法:生物信息学技术检测EMI2在胆管癌中的表达情况,构建沉默EMI2的HuCCT1稳转株细胞(shEMI2),观察其对HuCCT1细胞增殖、侵袭和EMT的影响.结果:生物信息学技术显示EMI2在胆管癌组织中高表达,Western Blot和RT-PCR检测EMI2敲低效率.CCK-8验证shEMI2组的OD450值要低于shCtrol组(P<0.05),且shEMI2组细胞克隆形成数目(26±2)低于shCtrol组(57±4).侵袭结果显示,shEMI2组侵袭细胞数(39±4.92)较shCtrol组(195±14.00)少.细胞周期实验显示,shEMI2组较shCtrol组G2/M期的细胞比例减少,处于G1期的细胞比例增多(P<0.05).细胞凋亡实验表明,shEMI2组的细胞凋亡率提高(P<0.05).Western Blot和免疫荧光结果提示,沉默EMI2可以促进E-cadherin蛋白上调,N-cadherin和Vitmentin蛋白含量下调.结论:沉默EMI2基因抑制iCCA细胞增殖、侵袭、迁移和EMT的过程.