双酶显色-紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺的含量

建立了基于二胺氧化酶-辣根过氧化物酶双酶显色的紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺含量的方法.取10 mL牛奶样品,加入10 mL 2％(质量分数)硝酸铅标准溶液,混匀,再加入20 mL 0.1％(质量分数)三氯乙酸标准溶液,混匀,离心,取上清液,将溶液pH调至7.2,得到待测样品溶液.移取1.0 g?L-1二胺氧化酶标准溶液100μL,加入100μL待测样品溶液,于50℃水浴中反应15 min.反应结束后,依次加入1.0 g?L-1辣根过氧化物酶标准溶液50μL,0.5 g?L-1四甲基联苯胺标准溶液200μL和2 mol?L-1盐酸溶液50μL,采用紫外-可见分光光度计测定体系的吸光度.结果显示:样品溶液由无色变为蓝色又变为黄色;组胺、腐胺的浓度分别在2.5～150μmol?L-1和5～200μmol?L-1内与其对应的吸光度呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.6522μmol?L-1和1.1341μmol?L-1.对空白牛奶样品进行加标回收试验,组胺和腐胺的回收率分别为80.5％～88.3％和89.5％～92.3％,测定值的相对标准偏差(RSD,n=5)分别为2.5％～4.4％和4.4％～5.1％.