2种实时荧光定量聚合酶链式反应法检测HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV RNA的一致性分析

目的 评价S(Shengxiang)公司、X(Xinbo)公司两种实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)方法定量检测HBV RNA结果的一致性.方法 从2007年7月—2008年8月组建的108例慢性乙型肝炎(CHB)前瞻性随访患者队列中,选取HBeAg血清学转换患者20例进行1:1倾向性评分匹配未转换患者20例,采用S公司和X公司两种real-time PCR定量检测方法,回顾性检测基线、12周、24周及48周血清样本HBV RNA.符合正态分布的计量资料组间比较采用配对t检验;不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验.计数资料采用χ2检验.通过Pearson相关系数、组内相关系数(ICC)和Bland-Altman法评价检测结果的一致性.结果 S试剂检测132份血清样本,X试剂检测154份血清样本,两种试剂对送检样本中HBV RNA检出率均为100％.两种试剂共同检测血清样本131份,在基线、随访12周、24周及48周分别检测34、29、35及33份血清,X试剂检测HBVRNA定量数据分别为(5.75±1.64、5.43±1.73、5.13±1.54、4.76±1.55)log10拷贝/mL,均高于S试剂(4.80±1.48、4.52±1.53、4.10±1.50、3.92±1.43)log10拷贝/mL,差异均有统计学意义(t=8.348、t=5.341、Z=-5.086、Z=-4.762,P值均<0.001).两种方法相关性分析中,r及ICC值分别为0.915(95％CI:0.836～0.957)与0.771(95％CI:-0.021～0.931)、0.849(95％CI:0.701～0.927)与0.733(95％CI:0.138～0.902)、0.951(95％CI:0.905～0.975)与0.776(95％CI:-0.058～0.942)、0.933(95％CI:0.867～0.967)与0.804(95％CI:-0.014～0.944)(P值均<0.05).Bland-Altman分析表明,两种方法检测结果中96.18％(126/131)的样本差异位于平均差±1.96标准差之间.结论 X试剂的HBV RNA定量结果高于S试剂定量结果,但两种real-time PCR定量检测HBeAg血清学转换和未转换CHB患者HBV RNA结果的一致性良好.