肿瘤坏死因子诱导基因-6对牙髓干细胞成牙分化的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子诱导基因-6(TSG-6)对牙髓干细胞(DPSC)成牙能力的作用.方法:收集30颗无龋坏和炎症的完整智齿,取出牙冠部牙髓,使用改良组织块法对DPSC进行分离、培养.通过慢病毒感染对DPSC中TSG-6的表达进行增强(Ad-TSG-6-DPSC)和敲低(TSG-6-RNAi DPSC).细胞分为正常组和增强组,炎症组和敲低组.正常组和增强组分别采用DPSC和Ad-TSG-6 DPSC,加入矿化诱导液培养.炎症组和敲低组分别采用DPSC和TSG-6-RNAi DPSC,加入含终浓度50μg/L TNF-α的矿化诱导液培养.釆用Western blot法检测TSG-6、骨形态发生蛋白(BMP)-4、Smad1/5、牙本质基质蛋白(DMP)-1和牙本质涎磷蛋白(DSPP)蛋白的表达.将各组细胞分别与水凝胶组合,注射于裸鼠皮下进行异位成骨实验.取皮下异位组织行HE和MASSON染色,采用免疫组化检测组织中骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)蛋白的表达.结果:与正常组比较,增强组细胞BMP-4、Smad1/5、DSPP、DMP-1蛋白表达水平降低(P<0.05).与炎症组比较,敲低组细胞BMP-4、Smad1/5、DSPP、DMP-1蛋白表达水平升高(P<0.05).正常组和增强组裸鼠有皮下异位组织形成,正常组形成的皮下异位组织富含胶原纤维,增强组形成的皮下异位组织细胞十分密集,且胶原纤维含量较少;与正常组比较,增强组皮下异位组织中OCN和OPN蛋白的表达降低(P<0.05).结论:TSG-6是DPSC成牙分化过程中的下调蛋白,降低TSG-6的表达可能提高DPSC在炎症环境中的成牙分化能力.