着丝粒蛋白U对胃癌细胞增殖、糖酵解的影响及机制
Shandong Medical Journal(2022)
Abstract
目的 探讨着丝粒蛋白U(CENPU)对胃癌细胞增殖、糖酵解的影响及可能机制.方法 体外培养人胃癌细胞系GES-1、AGS、MKN45、HGC-27细胞,采用实时荧光定量PCR法测定各细胞系中CENPU mRNA表达;根据CENPU mRNA表达情况筛选HGC-27细胞进行后续实验,并将其分为空白对照组(NG组:细胞不做特殊处理)、阴性对照组(si-CENPU-NC组:转染si-CENPU-NC序列)、沉默CENPU表达组(si-CENPU组:转染si-CENPU序列).采用CCK-8法、平板克隆实验分别检测各组HGC-27细胞增殖情况、克隆形成率;酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组HGC-27细胞糖酵解过程关键指标葡萄糖消耗(GC)、乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷(ATP)、丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)水平;免疫印迹法检测各组HGC-27细胞蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达.结果 CENPU mRNA在胃癌细胞中异常高表达,且HGC-27细胞中CENPU mRNA表达最高(P<0.05),选择HGC-27细胞进行后续实验.与NG组、si-CENPU-NC组比较,si-CENPU组HGC-27细胞增殖抑制率升高(P均<0.05),克隆形成率、细胞中GC、LDH、ATP、HK、PK水平及p-AKT/AKT、p-STAT3/STAT3水平均降低(P均<0.05).结论 下调CENPU表达可抑制胃癌细胞增殖并干扰细胞糖酵解,其机制可能通过抑制AKT/STAT3通路活化实现.
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