人β-防御素-3调控呼吸道合胞病毒致哮喘幼鼠的气道重塑及白细胞激活

目的:探究人β-防御素-3(hBD3)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染诱发哮喘幼鼠气道重塑与白细胞激活的影响及其机制.方法:采用卵清白蛋白(OVA)合并RSV诱发建立幼鼠哮喘模型,期间予100μg·kg-1·d-1 hBD3溶液灌胃;制备肺泡灌洗液(BALF),瑞氏染色测定BALF细胞总数与各细胞计数,ELISA法检测BALF和血清中免疫球蛋白IgE、白细胞介素(IL)-4、IL-5、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色、PAS染色和Masson染色观察肺组织病理学变化情况,观察切片测定各项气道重塑指标,免疫组化染色检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,蛋白质印迹法检测肺组织生长因子与自噬相关蛋白的表达.结果:相较于模型组,经hBD3作用的幼鼠BALF中细胞总数以及嗜酸粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的比例均降低,BALF和血清中IgE、IL-4、IL-5、TNF-α水平均下降,肺组织损伤明显缓解,炎症细胞浸润减轻,杯状细胞减少,肺组织胶原纤维面积较小,管壁面积/气管内周长(WAt/Pi)、支气管平滑肌面积/气管内周长(WAm/Pi)及支气管平滑肌细胞核数目/气管内周长(N/Pi)均下降,α-SMA阳性表达率下降,同时肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)以及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与Beclin-1的蛋白表达水平均下调,P62蛋白表达水平则上调,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:hBD3能够抑制RSV感染诱发哮喘幼鼠模型的气道炎症和气道重塑过程,介导白细胞失活,该作用可能与调控自噬水平相关.