虫草素抑制哮喘大鼠支气管上皮细胞间充质转化

目的 考察虫草素(Cor)抑制哮喘大鼠上皮细胞间充质转化的作用机制.方法 将大鼠随机分为4组(n=10):对照组、模型(OVA)组、OVA+10 mg/kg Cor组、OVA+50 mg/kg Cor组.治疗7 d后,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞计数,苏木精-伊红(HE)染色评价气道炎性反应和气道重塑程度,Masson三色染色检测上皮胶原沉积.将人支气管上皮样细胞16HBE分为3组:对照组、TGF-β1组和TGF-β1+Cor组.免疫荧光染色检测细胞中c-Jun的表达.CCK-8法和Transwell小室法检测细胞的增殖和迁移.免疫组织化学染色或Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、α-SMA、vimentin、Smad3、p-Smad3、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平.结果 与对照组相比,OVA组的胶原纤维面积和细胞计数显著增加(P<0.05);与OVA组相比,OVA+10 mg/kg Cor组和OVA+50 mg/kg Cor组的胶原纤维面积和细胞计数均减少(P<0.05).与对照组相比,OVA组的E-cadherin的染色程度和蛋白表达水平均降低,而α-SMA的染色程度升高,N-cadherin、α-SMA和vimentin蛋白表达水平均升高(P<0.05);与OVA组相比,OVA+10 mg/kg Cor组和OVA+50 mg/kg Cor组的E-cadherin的染色程度和蛋白表达水平均升高,而α-SMA的染色程度降低,N-cadherin、α-SMA和vimentin蛋白表达水平均降低(P<0.05).与对照组相比,TGF-β1组的细胞活力和迁移细胞数均升高(P<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+Cor组的细胞活力和迁移细胞数均降低(P<0.05).与对照组相比,TGF-β1组的E-cadherin蛋白表达水平降低,而N-cadherin、α-SMA、vimentin、p-Smad3和p-ERK1/2蛋白表达水平均升高(P<0.05).与TGF-β1组相比,TGF-β1+Cor组的E-cadherin蛋白表达水平升高,而N-cadherin、α-SMA、vimentin、p-Smad3和p-ERK1/2蛋白表达水平均降低(P<0.05).与对照组相比,TGF-β1组的c-Jun的相对荧光强度升高(P<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+Cor组的c-Jun的相对荧光强度降低(P<0.05).结论 Cor通过抑制Smad3和ERK1/2信号通路及c-Jun抑制哮喘中的上皮细胞间充质转化(EMT).