大肠杆菌离体重组系统转运FhaB突变体

目的 探讨离体重组系统用于双组分转运系统机制研究的可行性.方法 通过构建不同分子质量大小的FhaB突变体,制备成原生质球,加入到FhaC蛋白脂质体中,使用蛋白酶K消化的方法检测所构建的离体重组体系转运不同大小底物的能力.结果 成功构建突变体后,检测到原生质球分泌的37、60和80 ku大小的条带,并且含FhaC的蛋白脂质体能转运这3种分子质量大小的底物,此次所转运的底物分子质量高达80 ku.结论 体外构建的重组转运系统可以转运大分子质量的底物,可尝试使用该体系进行双组分系统机制的研究.