环磷酰胺诱导的尼罗罗非鱼体内外肝损伤模型的构建

以环磷酰胺(CTX)为诱导物,建立罗非鱼体内外急性肝损伤模型.体外,0、5、10、15、20和25mmol·L-1 CTX分别作用于离体培养的罗非鱼精密肝切片(PCLS)6h后,测定切片培养上清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,同时收集肝切片,用噻唑蓝(MTT)法检测肝切片增殖活性,测定切片内总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平.体内,采用胸腔注射法造模,每千克鱼体重分别注射0、10、25、75和100 mg环磷酰胺(下文以mg·kg-1表示),每隔3d给药1次,连续3次.末次给药后第4天取血,测定罗非鱼血清中GPT、GOT和LDH及肝组织匀浆中T-AOC、MDA、SOD和GSH水平.结果显示:20～25mmol·L-1CTX作用体外培养精密肝切片6 h及75～100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼后,均可以导致GPT、GOT和LDH活力显著升高;T-AOC、SOD活力及GSH含量显著下降,MDA含量显著提高.同时,20和25mmol·L-1CTX能导致肝切片增殖活性显著下降,分别为空白对照组的67.29％和55.41％,且有剂量依赖性.结果表明:CTX可引起罗非鱼肝损伤;分别采用20mmol·L-1CTX作用体外培养PCLS 6 h或者采用75～100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼,每隔3d给药1次,连续3次,均可以构建体内外急性肝损伤模型.