夜香树CnDXR与CnDXS1基因的克隆与表达分析

本研究从转录水平和生化水平,阐明夜香树释香过程中萜类物质的变化规律和生物合成的分子机制,为夜香树萜类生物合成途径和夜香树花香基因工程的研究提供借鉴.结果 如下:(1)采用RT-PCR与RACE相结合的技术克隆并筛选了2个夜香树花香萜类物质代谢途径关键限速酶基因的全长cDNA,分析CnDXR和CnDXS1在花和叶中24 h内相对表达量变化规律,结果表明:在花中,2个基因的表达均具有一定的节律性,18:00后,花中2个基因相对表达量均呈现上升趋势,接近6:00时,相对表达量呈现下调趋势;在叶中,CnDXR相对表达量变化较小,CnDXS1夜间相对表达量总体高于白天.(2)利用己克隆的部分萜类代谢途径关键限速酶基因ORF区构建植物过表达载体,用农杆菌介导的叶盘法获得过表达k326植株,初步验证这些基因在萜类物质代谢中的功能:CnDXS1基因过表达植株叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素合成量偏低,CnDXR过表达烟草生长状况好于对照,叶绿素a、类胡萝卜素高于对照.