eIF6基因表达对结直肠癌细胞侵袭转移及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探究真核起始因子6 (eIF6)的表达对结直肠癌细胞侵袭转移及Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的影响.方法 采用免疫组化方法检测结直肠癌组织及其癌旁组织中eIF6蛋白的表达.转染构建过表达/敲低eIF6的SW837细胞株,分为对照组、空质粒组、过表达组和敲低组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术(WB)检测各组SW837细胞中eIF6 mRNA和蛋白表达水平;应用WB检测各组SW837细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键因子β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、后期促进复合体(APC)和通路下游靶基因锌指转录因子SNAI (Snail)以及上皮间质转化(EMT)标志物E型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用Transwell小室和划痕实验检测各组SW837细胞的侵袭和迁移能力;采用皮下成瘤实验检测各组SW837细胞的体内成瘤能力并经苏木精伊红(HE)染色观察移植瘤病理学变化.结果 相较于癌旁组织,结直肠癌组织中eIF6蛋白表达阳性率升高(P＜0.05);相较于对照组,过表达组SW837细胞β-catenin、Snail和Vimentin蛋白表达水平升高,GSK-3β、APC和E-cadherin蛋白表达水平降低,细胞迁移侵袭能力和体内成瘤能力增强,其差异均有统计学意义(P＜0.05);敲低组SW837细胞β-catenin、Snail和Vimentin蛋白表达水平降低,GSK-3β、APC和E-cadherin蛋白表达水平升高,细胞迁移侵袭能力和体内成瘤能力减弱,其差异也均有统计学意义(P＜0.05).结论 eIF6可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,从而促进结直肠癌细胞的侵袭转移.