Colgalt2敲除对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠CD4T细胞记忆和归巢的影响

目的 初步探索糖基转移酶Colgalt2基因敲除对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠模型中CD4 T细胞记忆和归巢的影响.方法 随机抽取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级6～8周的基因敲除(Colgalt2-/-)小鼠与野生型Colgalt2+/+小鼠各18只,建立Con A诱导的AIH小鼠模型.检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,采用HE染色观察肝组织病理变化,采用体外磁珠分选脾脏CD4+T细胞,采用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏及分选后CD4+T细胞亚型比例.结果 与Colgalt2+/+小鼠相比,Con A刺激12 h Colgalt2-/-小鼠血清ALT[(15610±2869)U/L vs(5009±1042)U/L;t=3.474,P=0.006]和AST[(16080±2631)U/L vs(4453±893.7)U/L;t=4.185,P=0.002]水平均显著升高.Con A刺激12 h Colgalt2-/-小鼠肝损伤分级显著高于Colgalt2+/+小鼠[(3.17±0.17)级vs(2.17±0.17)级],差异有统计学意义(t=4.243,P=0.002).Con A刺激12 h Colgalt2-/-小鼠脾脏CD4+CD28-[(97.80±0.46)％vs(88.85±3.35)％;t=2.650,P=0.024]和CD4+CD62L-[(97.98±0.46)％vs(88.68±3.38)％;t=2.669,P=0.023]均显著高于Colgalt2+/+小鼠.体外脾脏实验表明,Con A刺激12 h Colgalt2-/-小鼠CD4+CD28-[(94.88±1.20)％vs(82.97±2.70)％;t=4.295,P=0.002]和CD4+CD62L-[(99.95±0.02)％vs(99.24±0.26)％;t=2.731,P=0.021]均显著高于Colgalt2+/+小鼠.结论 Colgalt2基因敲除使脾脏CD4+CD28-和CD4+CD62L-细胞亚群表达上调从而加重Con A诱导的AIH.