TRAF6基因沉默对肝癌细胞SMCC7721的影响及可能作用机制

目的:探索肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因沉默对肝癌SMCC7721的影响及可能作用机制.方法:运用细胞转染技术构建细胞系,并经定量实时PCR验证.运用CCK8法、Transwell实验和EdU实验观察细胞变化,使用Western blotting技术检测,探索其可能作用机制.结果:TRAF6 RNA在肝癌细胞中异常上调.选取SMCC7721作为TRAF6高表达细胞,CCK8实验和EdU实验结果表明,TRAF6表达降低显著抑制了SMCC7721细胞的增殖,而TRAF6基因敲除细胞中过表达TRAF6可使细胞增殖恢复和增强.Transwell实验检测证实siRNA处理的SMCC7721细胞侵袭性显著降低;经Lv-Rescue质粒处理后,细胞侵袭恢复并增强.Western blotting检测提示siRNA组细胞YB-1、Wnt、β-catenin、c-myc、cyclin D1蛋白水平明显下调;与此相反CYLD蛋白表达水平上升.结论:TRAF6作为肿瘤细胞的重要连接蛋白,可能通过修饰(泛素化)YB-1进而提高促癌因子c-myc、cyclin D1表达,提高细胞的增殖及侵袭能力,而该过程可能与Wnt/β-catenin通路密切正相关,与CYLD蛋白表达负相关.