miR-1303靶向抑制LPAR3对肾癌786-O细胞增殖和迁移的影响及机制研究
International Journal of Surgery(2022)
Abstract
目的:探讨微小RNA(miRNA)-1303通过靶向调控溶血磷脂酸受体3(LPAR3)的表达抑制肾癌786-O细胞增殖和迁移的机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞株(A498、ACHN、786-O、OS-RC-2)及正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303的相对表达量。将miR-1303模拟物和阴性对照序列分别转染至miR-1303表达最低的肾癌细胞,分别作为miR-1303组和阴性对照组。qRT-PCR检测两组细胞miR-1303的相对表达量。MTT法和Transwell迁移实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力。生物信息学软件RegRNA 2.0预测miR-1303的靶基因。双荧光素酶报告基因检测miR-1303与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blotting法检测LPAR3的相对表达量。计量资料以均数±标准差(
±
s)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。
结果:肾癌细胞株A498、ACHN、786-O、OS-RC-2和正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303表达分别为0.51±0.04、0.79±0.02、0.21±0.04、0.55±0.07和1.00±0.05,肾癌细胞株中miR-1303表达均低于HK-2(
P<0.05),786-O细胞中的相对表达量最低(
F=29.50,
P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-1303组细胞miR-1303的表达明显增加[(1.00±0.01)比(7.98±0.88),
t=7.95,
P<0.01]。miR-1303组细胞吸光度值明显低于阴性对照组(
P<0.05)。miR-1303组细胞迁移数明显低于阴性对照组(
P<0.05)。miR-1303可与LPAR3 mRNA互补配对结合(
P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-1303组786-O细胞中
LPAR3基因表达显著下降[(1.00±0.01)比(0.23±0.03),
t=23.56,
P<0.01]。
结论:miR-1303可能通过靶向抑制LPAR3的表达,抑制肾癌786-O细胞的增殖能力和迁移能力。
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Key words
Renal neoplasms,MicroRNAs,Cell proliferation,Cell migration
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