人A组G2P[4]型轮状病毒的分离培养和鉴定

International Journal of Virology(2022)

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摘要
目的:对我国轮状病毒A组G2P[4]流行株进行分离培养和鉴定。方法:采用轮状病毒抗原胶体金法筛查56份病毒性腹泻患儿粪便标本,对阳性样本VP7和VP4基因测序确定其G和P基因型别,并接种至MA-104细胞,持续传代。运用SDS-PAGE电泳、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光、嗜斑实验和电镜等技术进行鉴定。结果:检出轮状病毒阳性样本46份,测序确定G2P [4]型2株,细胞培养盲传5代,嗜斑纯化后G2P[4]型毒株RNA PAGE电泳图呈DS-1株轮状病毒的(4:2:3:2)形态,电镜下呈车轮状形态,轮廓清晰,病毒滴度随时间变化逐步上升。结论:成功从粪便样本中分离和培养出G2P[4]型A组轮状病毒。
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关键词
Rotavirus,Isolation and culture,PAGE,Electron microscope,Growth curve
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