长链非编码RNA FAM224A调控miRNA-590-3p表达对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

秦黎, 刘雨欣,巫梦雪,夏欣,胡洁,刘文娟

Cancer Research and Clinic(2022)

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摘要
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)FAM224A调控miRNA-590-3p(miR-590-3p)表达对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响。方法:选择人卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及人正常卵巢上皮细胞株IOSE80,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测FAM224A在各个细胞株中的相对表达水平,筛选FAM224A相对表达水平最低的细胞株进行后续实验。将细胞分为FAM224A组(转染FAM224A模拟质粒)和对照组(转染对照模拟质粒),分别采用CCK-8法和细胞划痕实验检测两组细胞增殖和迁移能力。采用生物信息学网站LncBase v.2预测FAM224A可能互补结合的靶基因为miR-590-3p。qRT-PCR检测miR-590-3p和叉头框蛋白A2(FOXA2)mRNA的相对表达水平,蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达情况。结果:卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及正常卵巢上皮细胞株IOSE80中FAM224A的相对表达水平分别为0.23±0.04、0.65±0.05、0.45±0.03、0.63±0.08和1.02±0.11,差异有统计学意义( F=14.78, P<0.01),其中FAM224A相对表达水平最低的细胞株是OC3。CCK-8法检测结果显示,培养第2、3、4、5天,FAM224A组OC3细胞增殖能力均低于对照组(均 P<0.05)。FAM224A组和对照组OC3细胞的划痕愈合率分别为(18.6±2.3)%和(71.7±7.2)%,差异有统计学意义( t=6.99, P<0.01)。FAM224A组和对照组OC3细胞中FAM224A相对表达水平分别为12.36±1.45和1.14±0.24( t=13.08, P<0.01);miR-590-3p相对表达水平分别为0.19±0.06和1.04±0.20( t=4.01, P<0.01);FOXA2 mRNA相对表达水平分别为6.37±1.37和1.05±0.08( t=3.86, P<0.01)。与对照组比较,FAM224A组OC3细胞FOXA2蛋白表达升高,细胞增殖蛋白细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、cyclin D3表达均降低,细胞迁移蛋白Snail表达降低。 结论:FAM224A在卵巢癌细胞株中低表达,FAM224A通过抑制miR-590-3p表达降低卵巢癌OC3细胞的增殖和迁移能力。
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关键词
Ovarian neoplasms,MicroRNAs,Forkhead transcription factors,Cell proliferation,Cell migration
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