五味子油联合莪术油防治肝纤维化的作用及机制研究

目的 研究五味子油联合莪术油防治肝纤维化的作用及机制.方法 采用蛋氨酸和胆碱缺乏及铁添加氨基酸饲料喂养小鼠构建非酒精脂肪肝炎伴肝纤维化模型,将112只C57BL/6小鼠分为对照组、模型组、扶正化瘀胶囊(585 mg/kg)组、五味子油单独给药组、莪术油单独给药组以及五味子油联合莪术油给药组;造模成功后,对照组和模型组ig 0.5％羧甲基纤维素钠溶液,各给药组ig相应药物,连续6周;采用酶标仪测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肝组织病理变化;采用ELISA法检测小鼠血清中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;采用qRT-PCR法检测小鼠肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、TGF-βl和Smad3的mRNA表达情况.人肝星形LX-2细胞给予药物预处理,再加入TGF-β1因子,采用Western blotting法检测细胞Collagen Ⅰ和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达情况.结果 体内实验结果显示,与模型组相比,各给药组血清中ALT和AST活性均显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),其中五味子油与莪术油联合给药高剂量组抑制小鼠ALT活性更为显著;肝脏颜色、光泽和质地都有明显改善,肝组织中脂肪空泡化改善、炎性细胞浸润减少;肝组织Hyp和血清TGF-β1、TNF-α含量均显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),其中联合给药高剂量组改善小鼠肝组织Hyp含量更为显著;肝组织Collagen Ⅰ、TGF-β1和Smad3 mRNA表达水平显著降低(P＜0.05、0.01、0.001).体外实验结果显示,五味子油与莪术油联合给药组能下调TGF-β1诱导的LX-2细胞Collagen Ⅰ和α-SMA蛋白表达.结论 五味子油和莪术油均具有抗肝纤维化作用,且五味子油与莪术油联用的抗肝纤维化效应明显强于各药物的单独使用.