Effect of Rongjin Niantong Fang(荣筋拈痛方)on the Expression of Autophagy Related Gene of Interleukin-1β-induced Rat Chondrocytes in Vitro

目的:观察荣筋拈痛方对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外大鼠软骨细胞自噬相关基因表达的影响,探讨其防治膝骨关节炎的作用机制.方法:取4周龄SD大鼠膝关节软骨,进行软骨细胞的体外分离培养,选取第2代软骨细胞甲苯胺蓝染色进行细胞鉴定.经IL-1β10 ng·mL-1诱导建立体外软骨细胞炎症模型,诱导成功后,给予荣筋拈痛方(50,100,200μg·mL-1)孵育48 h.将细胞分为空白对照组,模型对照组,荣筋拈痛方低、中、高剂量组.分别采用CCK-8法检测荣筋拈痛方对软骨细胞活性的影响,qPCR法检测软骨细胞中LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA表达,Western Blot法观察自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin 1的蛋白表达水平.结果:与模型对照组比较,荣筋拈痛方低、中、高剂量组均显著提高细胞活力,呈剂量依赖性增加(P<0.01);模型对照组较空白对照组LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的蛋白表达水平升高(P<0.05);经100μg·mL-1荣筋拈痛方干预后LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:荣筋拈痛方可能通过抑制自噬水平,从而具有延缓膝骨关节炎退变的作用.