基于CRISPR/Cas9系统制作拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3双突变体纯合株系
Journal of Liaocheng University（Natural Science Edition)（2022）
Abstract
CRISPR/Cas9系统在植物遗传改良及功能基因研究中有着非常重要的作用.本研究中,根据拟南芥糖基转移酶家族中同工酶UGT79B2/79B3的前体序列,设计针对靶基因UGT79B2/79B3的特异的sgRNA引导序列,构建ugt79b2/79b3-Cas9双突变植物表达载体,并转化到根癌农杆菌GV3101中.将含有目标载体的GV3101活化后,花浸染法浸染拟南芥.以后代阳性株系DNA作为模板,送公司测序.99株阳性转基因株系中分子鉴定发现有24株发生突变,其中只有1株发生ugt79b2/79b3双突变.该研究结果为拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3突变体的功能开发提供了基础研究与方法支持.
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