脐带间充质干细胞来源外泌体对脑出血模型小鼠海马神经元的保护作用

背景:研究证明间充质干细胞来源外泌体可抑制神经炎症和脑出血损伤,目前关于间充质干细胞来源外泌体通过血红素加氧酶1介导对脑出血后海马神经元保护作用机制的研究较少.目的:探讨脐带间充质干细胞来源外泌体对脑出血后海马神经元的保护作用及其机制.方法:①自体血注射建立小鼠脑出血模型,在脑出血后8 h尾静脉注射脐带间充质干细胞来源外泌体,在脑出血后24 h,4 d及30 d采用蛋白免疫印迹法检测血红素加氧酶1、高迁移率组蛋白B1和Toll样受体4的表达;②体外应用氯高铁血红素建立小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)脑出血模型,在造模前给予脐带间充质干细胞来源外泌体预处理12 h,然后给予氯高铁血红素刺激HT22细胞6 h,蛋白免疫印迹法检测血红素加氧酶1的表达;③慢病毒转染HT22细胞使血红素加氧酶1低表达,然后同样给予脐带间充质干细胞来源外泌体预处理12 h,氯高铁血红素刺激6 h,蛋白免疫印迹法检测血红素加氧酶1的表达.结果 与结论:①在脑出血后24 h,4 d及30 d时,损伤侧海马组织中血红素加氧酶1表达量显著升高(均P<0.05),与假手术组比较,脑出血组小鼠在脑出血后第4天血红素加氧酶1、高迁移率组蛋白B1和Toll样受体4蛋白表达显著升高(均P<0.05),与脑出血组相比,脑出血+外泌体组血红素加氧酶1、高迁移率组蛋白B1和Toll样受体4蛋白表达显著降低(均P<0.05);②体外脑出血模型中,与对照组比较,氯高铁血红素+PBS组HT22细胞中血红素加氧酶1蛋白表达显著升高,与氯高铁血红素+PBS组比较,氯高铁血红素+外泌体组HT22细胞中血红素加氧酶1蛋白表达明显降低(均P<0.05);③慢病毒转染HT22细胞敲低血红素加氧酶1表达后,敲低血红素加氧酶1+氯高铁血红素+PBS组与敲低血红素加氧酶1+氯高铁血红素+外泌体组的血红素加氧酶1蛋白表达无显著差异;④结果表明,脐带间充质干细胞来源外泌体对脑出血后海马神经元损伤具有保护作用,其机制可能是与血红素加氧酶1调节高迁移率组蛋白B1及Toll样受体4相关炎性通路有关.