吐温对钝齿棒杆菌产L-精氨酸代谢的影响

目的:以课题组构建的钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT NAGK M4 △proBANcgl1221AdtsR1(CCM01)为出发菌株,探究吐温(Tween)对该菌产精氨酸代谢的影响.方法:优化精氨酸发酵及Tween质量浓度,测定菌体生长量、L-精氨酸产量、发酵液残糖量考察Tween 40、Tween 80及Tween 80结合油酸对菌株CCM01产精氨酸的影响;采用实时聚合酶链式反应检测L-精氨酸合成相关基因转录水平.结果:在CCM01菌株发酵中添加Tween 40、Tween 80及Tween 80结合油酸,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate,NADPH)供应提升,相应精氨酸产量提高,尤其在Tween 80和油酸按物质的量比1∶0.1添加的培养条件下,与出发菌株CCM01相比,胞内NADPH的生成提升至2.56倍,L-精氨酸产量提高了29.43％;同时,合成NADPH的磷酸戊糖途径相关基因上调,作为L-精氨酸合成途径的负调控因子——脂肪酸响应蛋白FarR编码基因下调,相应的L-精氨酸合成途径相关基因转录水平上调,表明吐温可从两方面提高精氨酸产量.