甲醛对HepG2细胞胆汁酸代谢影响

目的 观察甲醛(FA)对人肝癌HepG2细胞内胆汁酸合成和外排影响,探讨甲醛引起肝细胞损伤机制.方法 以不同浓度甲醛对HepG2细胞染毒12、24和48 h,采用细胞毒性试验(MTT法)检测细胞活性;以不同浓度甲醛对HepG2细胞染毒24和48 h,采用化学-酶法测定HepG2细胞内总胆汁酸(TBA)含量;采用实时定量PCR法检测细胞内胆汁酸合成相关基因胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、固醇12α羟化酶(CYP8B1)、肝X受体(LXR)、法尼类X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)以及胆汁酸外排相关基因胆盐输出泵(BSEP)mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞内胆汁酸合成关键蛋白CYP7A1以及胆汁酸外排蛋白BSEP的表达水平.结果 与对照组比较,0.10～0.50 mmol/L甲醛组HepG2细胞活性明显降低(P＜0.05);与阴性对照组比较,染毒24 h,0.10、0.20mmol/L甲醛组HepG2细胞内TBA含量明显升高,CYP7A1、CYP8B1、FXR mRNA表达增加(P＜0.05),0.20 mmol/L甲醛组HepG2细胞内BSEP mRNA表达水平增加(P＜0.05).与阴性对照组比较,染毒24h,0.10、0.20 mmol/L甲醛组HepG2细胞内CYP7A1蛋白表达水平增加(P＜0.05).结论 一定剂量的甲醛对肝脏细胞活性具有明显抑制作用,且能引起肝细胞内胆汁酸含量增多(胆汁淤积),其机制可能与促进肝细胞CYP7A1和CYP8B1的表达有关.