预知子提取物增敏奥沙利铂诱导结肠癌HCT116细胞凋亡的研究

目的 探讨预知子提取物增敏奥沙利铂(OXA)诱导结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及机制,为减少OXA毒副作用发生的临床应用提供研究基础.方法 将预知子乙酸乙酯萃取成分进行中压柱层析分离,并进行抗肿瘤药效筛选,获取活性部位B14,并进一步分离和鉴定该活性部位成分;运用MTT法检测B14、OXA及二者联用对HCT116的增殖抑制作用;采用Com-puSyn软件评价联合药效,确定药物联用最佳剂量;流式细胞术检测B14与OXA联用后HCT116细胞的凋亡率及周期分布;Western blot法检测凋亡及信号通路相关蛋白的表达水平.结果 筛选确定预知子活性部分B14,检测并明确其主要成分为皂苷B和α-常春藤皂苷;6μg·mL-1 B14可显著促进15μg·mL-1 OXA对HCT116细胞的增殖抑制作用(P<0.001),促进细胞凋亡(P<0.001);联合组细胞周期被阻滞于G2/M期(P<0.001);Western blot结果显示,与OXA组比较,联合组Bcl-2、Caspase-3及Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01,P<0.001),Bax、Cyt-c、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-3/Caspase-3比值及p-p38 MAPK显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001).结论 预知子提取物具有增敏OXA诱导HCT116凋亡的作用,其机制可能与阻滞细胞周期在G2/M期及激活p38 MAPK介导的线粒体凋亡通路有关.研究结果为降低OXA毒副作用的临床应用提供了线索.