山羊伪结核棒状杆菌LY20株分离鉴定及病理组织学观察

旨在明确福建某羊场引起山羊皮肤脓肿的病原,无菌采集脓液,进行细菌分离培养、培养特性观察、形态学镜检、生化试验及16S rRNA进化树分析,结果分离到1株细菌,经鉴定确定为伪结核棒状杆菌,命名LY20株.毒力因子检测显示,分离菌携带PLD、NanH、FagA、FagB、FagC、FagD、OppA、OppB、OppC、OppD、OppF共11个毒力因子.PLD全基因进化树分析,结果伪结核棒状杆菌分成羊型和马型2个独立分支,分离菌与羊型聚在同一分支,亲缘性最近,与另一个分支马型亲缘性较远.核苷酸和氨基酸同源性比较显示,分离菌与羊型伪结核棒状杆菌同源性分别为99.9％和99.7％,与马型伪结核棒状杆菌的同源性分别为98.1％～98.2％和97.4％.用4.4×108 CFU/mL菌液,0.2 mL/只,腹腔接种小鼠,48 h内死亡率达100.0％,表现出较强的致病性;皮下接种小鼠,接种部位出现脓肿、破溃后流出淡黄色脓液.病理切片观察,可见肝脏淤血,脾淋巴细胞坏死,肺脏出血及中性粒细胞浸润,肾小管上皮细胞坏死,十二指肠和直肠上皮细胞脱落、间质出血、淋巴细胞浸润;皮肤化脓坏死性肌炎,肉芽组织增生.药敏结果显示,分离菌对环丙沙星、恩诺沙星等28种药物敏感,对阿米卡星、卡那霉素等7种药物耐药.研究结果表明,本次山羊皮肤脓肿为伪结核棒状杆菌感染所致,且小鼠病理组织学变化主要表现为出血、坏死及化脓性炎症.