MTT法检测奶牛乳房炎无乳链球菌活菌数的研究

为建立一种准确、快速反映无乳链球菌活菌数的计数方法,以奶牛乳房炎致病菌中的无乳链球菌为研究对象,对MTT计数法中的最大吸收波长、MTT和DMSO最佳用量、无乳链球菌与MTT最适反应时间等影响因素进行了优化,并对MTT法与平板菌落计数法定量检测结果进行了比较.结果显示:MTT法测定无乳链球菌活菌数的最大吸收波长为570 nm,0.5 mg/mL MTT与100μL无乳链球菌菌液反应的最佳反应量为45μL,最适反应时间为3 h,溶解产物的DMSO最佳用量为125μL;无乳链球菌活菌数在1.5×107～4.73×108 CFU/mL范围内时,MTT法与平板菌落计数法定量结果具有较好的线性关系(R2>0.99).结果表明,本研究建立的MTT法可用于无乳链球菌活菌计数.