基于iTRAQ定量蛋白质组学技术的不同感染状态结核病牛血清蛋白质组学分析

为了探明不同感染状态结核病牛血清蛋白质水平的差异,揭示结核病牛在不同感染状态下的生理状态.本研究通过皮内变态反应、IFN-γ释放试验从临床筛选结核病阳性牛(TB)和阴性牛(NC),根据牛鼻拭子巢式PCR检测结果将临床阳性牛(TB)分为PCR阳性结核病牛(TBP)和PCR阴性结核病牛(TBN),每组20头,采集血清.应用同位素标记绝对定量(iTRAQ)/质谱(MS)联用技术,筛选不同感染状态结核病牛血清中的差异蛋白,结合平行反应监测技术(PRM)对6个差异蛋白进行鉴定.结果表明:TB/NC组共筛选到223个差异蛋白(差异倍数≥1.5或者≤0.67倍,P≤0.05),其中上调蛋白112个,下调蛋白111个;TBP/TBN组共筛选到74个差异蛋白,其中上调蛋白46个,下调蛋白28个;PRM成功鉴定到了6个差异蛋白且变化趋势与iTRAQ结果一致;同时,生物信息学分析表明,牛感染结核分枝杆菌后补体系统和凝血系统发生了显著改变.本研究证实了不同感染状态结核病牛在血清蛋白质组成上的差异巨大,表明了牛结核病不同感染状态下不同的生理状态,为牛结核病的不同感染状态的区分提供了理论支持,同时为牛结核病的防控奠定了一定基础.