羊传染性脓疱病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
Chinese Veterinary Science（2020）
Abstract
为建立快速、灵敏的羊传染性脓疱病毒(ORFV)检测方法,本研究利用新一代的TaqMan MGB探针技术,根据ORFV编码F1L蛋白的059基因保守序列设计了1对引物和1条探针,建立了基于羊传染性脓疱病毒059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,对该法进行灵敏性、重复性、特异性分析,检测了14份临床样品.结果显示,所建立的方法标准曲线斜率为-3.36,截距为38.36,相关性系数(R2)为0.995,灵敏性在3.2?32 copies/μL之间,组内与组间重复的变异系数均小于1.65％,与常见羊病的病原体无交叉反应,表明所建立的基于ORFV 059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法适用于羊传染性脓疱病毒的快速检测.
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