响应面法优化三叶青总黄酮提取工艺及不同产地三叶青的质量评价

目的:优化三叶青总黄酮的提取工艺,比较不同产地三叶青的总黄酮得率,并采用指纹图谱结合化学模式识别的方法对其质量进行综合评价.方法:在单因素实验的基础上,以三叶青总黄酮得率为评价指标,运用Box-Behnken法优化三叶青总黄酮的提取工艺;在最佳提取工艺下,测定不同产地三叶青的总黄酮得率;在建立三叶青HPLC指纹图谱的基础上,采用相似度评价、聚类分析和主成分分析,对不同产地三叶青的质量进行综合性评价.结果:确定三叶青总黄酮的最佳提取工艺为提取时间65 min、提取温度83℃、料液比1:30 g·mL-1、乙醇浓度60％,该条件下总黄酮得率为37.89 mg·g-1;测得不同产地三叶青总黄酮得率差异较大,其中以云南楚雄、福建福州、贵州黔西南产三叶青的总黄酮得率较高;建立了全国9个不同产地的三叶青总黄酮HPLC指纹图谱,共标定11个共有峰,其相似度为0.770～0.961;聚类分析和主成分分析结果一致,可将不同产地的三叶青样品分为4类;主成分分析表明,前3个主成分的累积方差贡献率为84.92％,选择该3个因子对三叶青进行综合性评价;根据综合评价得分可知,浙江台州产三叶青质量最佳,云南楚雄次之,广东清远质量最差.结论:本研究结果为不同产地三叶青的质量评价提供参考,并为三叶青销售市场的规范和后续资源开发提供技术支撑.