蔷薇红景天总黄酮对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤的保护作用

目的 探讨蔷薇红景天总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE)、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对β-淀粉样蛋白25-35 (amyloid β-protein 25-35,Aβ25-35)诱导的小鼠海马神经元(hippocampal neuronal cell line,HT22)细胞损伤的保护作用.方法 采用Aβ25-35诱导HT22细胞损伤,建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)炎症细胞模型,然后将HT22细胞分为空白组、炎症模型组(15μnnol/L Aβ25-35)、阳性对照盐酸多奈哌齐组(12.5 μmol/L)、不同质量浓度TFE (12.5、25、50 μg/mL)和TFP(6.25、12.5、25 μg/mL)干预组、革质素(5、10、20 μmol/L)干预组,采用倒置显微镜观察细胞形态;MTT法测定HT22细胞存活率;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;膜联蛋白v-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法检测细胞凋亡;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的水平.结果 与空白组比较,模型组神经元细胞变圆,细胞核皱缩,数量减少,细胞间隙增大,存活率显著下降(P＜0.05),细胞凋亡率显著提高(P＜0.05);与模型组比较,蔷薇红景天TFE、TFP和草质素组的高、中、低剂量组均能改善细胞形态,减少细胞受损,提高细胞存活率,显著降低细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2的水平(P＜0.05),且成剂量依赖性.结论 蔷薇红景天TFE和TFP及其活性成分草质素对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤具有较好保护作用,其机制可能与拮抗Aβ25-35的细胞毒性、保护神经元、抑制HT22细胞炎症的发生有关.